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          如何知道對照品的濃度,在不同的測定方法中

          文章出處:小蔡 人氣: 發表時間:2018-07-31 16:00
          【用戶疑問】如何知道對照品的濃度,在不同的測定方法中

          【小編解答】其實要知道對照品的濃度,需要先確定你是用什么測定方法來測定的,不同的方法,求濃度當然也有不同的辦法,就比如測定方法分為:用HPLC測定、高效液相測定、紫外-可見分光光度法以及微生物檢定法等這些測定方法求濃度都有不同的方式。

          一、hplc測定求對照品濃度

          普通的有關物質對照溶液的濃度根據樣品的最低檢出限來定。它們之間的關系爲檢出限濃度的100倍爲對照溶液的濃度,對照溶液濃度的100倍爲樣品溶液的濃度。但在理論操作中應該根據詳細的液相條件來一定,參照基線樂音,峰行等要素一定,普通對照溶液濃度比檢出限濃度都大于100倍。還有一個說法是將樣品溶液的濃度定到作出的峰是平頭的,再定對照溶液濃度,但小編團體任務不太可行,那樣濃度太大了。

          二、高效液相測定求對照品濃度
          高效液相中同一種物質的峰面積和濃度呈正比。所以說濃度的公式為:供試品濃度=(樣品峰面積*對照品濃度)/對照品峰面積,非常簡單。

          三、紫外-可見分光光度法求對照品濃度

          根據 Lambert-Beer 定律 A = epsilon (入) × c × l ,這里的 A 是溶液的吸光度,是一個無量綱的值;epsilon (入) 是對應的吸收波長下物質的摩爾消光數值,單位是 L / (mol cm) 是溶液的摩爾濃度,單位是 mol/L ;l 是吸收光程,單位是 cm.
          一般由紫外-可見吸收光譜測得 A,由于是在 1 cm 的比色皿中測量的,所以光程為 1 cm,要求溶液的濃度,需要查該物質在對應波長下的“摩爾消光系數”,然后代入 A = epsilon (入) × c × l ,那么我們整理后得:c = A / [ epsilon (入) × l ],即可求出溶液的濃度。

           
          對照品濃度



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